Muestra de DNA | Sonda | ||
Desnaturalización (aumento de temperatura, etc.) |
Sonda monocatenaria
Sonda bicatenaria Desnaturalización (aumento de temperatura, etc.) |
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Hibridación
en condiciones muy rigurosas temperatura alta (p.ej. 42 °C), concentración alta de formamida, concentración baja de NaCl |
Hibridación
en condiciones poco rigurosas temperatura baja (p.ej. 35 °C), concentración baja de formamida, concentración alta de NaCl |
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sólo son estables los híbridos con complementariedad de secuencias perfecta sólo son estables los híbridos con complementariedad de secuencias perfecta |
se permiten híbridos con complementariedad de secuencias imperfecta se permiten híbridos con complementariedad de secuencias imperfecta |
Recuerde el efecto de la formamida y las sales sobre la capacidad de reasociación de las hebras de ácido nucleico: pág. 163 y cálculo de la temperatura de fusión.