12.3 Rigor en la hibridación

Muestra de DNA   Sonda

Desnaturalización (aumento de temperatura, etc.)

Sonda monocatenaria

Sonda bicatenaria

Desnaturalización (aumento de temperatura, etc.)

 
Hibridación
en condiciones muy rigurosas

temperatura alta (p.ej. 42 °C), concentración alta de formamida, concentración baja de NaCl
 
Hibridación
en condiciones poco rigurosas

temperatura baja (p.ej. 35 °C), concentración baja de formamida, concentración alta de NaCl

sólo son estables los híbridos con complementariedad de secuencias perfecta

sólo son estables los híbridos con complementariedad de secuencias perfecta
 

se permiten híbridos con complementariedad de secuencias imperfecta

se permiten híbridos con complementariedad de secuencias imperfecta

Recuerde el efecto de la formamida y las sales sobre la capacidad de reasociación de las hebras de ácido nucleico: pág. 163 y cálculo de la temperatura de fusión.