Actividad con el simulador de espectros de absorción ultravioleta de proteínas y ácidos nucleicos

Introduce los porcentajes de composición de la muestra, o elige entre los ejemplos de más abajo:

El código correspondiente a las muestras 1 y 2 de este experimento en concreto es
(Cada vez que se carga la página las muestras son diferentes y su código también)

Actividades para realizar con este simulador:

Supongamos que el DNA de cada muestra se ha extraído a partir de 1 g de tejido, se ha precipitado con etanol frío y se ha disuelto en 5 mL de agua destilada (etapa "a"). Después se ha añadido 1 mL de una disolución con 0.15 M de NaCl y 0.01 M de EDTA (etapa "b"). A continuación, se han tomado 200 µL de esta mezcla y se han diluido 20 veces con agua destilada (dilución 1/20) (etapa "c").

Puedes mostrar u ocultar un esquema de dicho procedimiento.

Para hacer la dilución de "b" a "c" debemos añadir mL de agua.

Ponemos entonces la muestra ya diluida ("c") en una cubeta de cuarzo para medidas espectrofotométricas y registramos su espectro UV en el simulador, obteniendo así los valores de absorbancia a 260 nm y a 280 nm.

Dato: El coeficiente de extinción del DNA bicatenario a 260 nm es 0.020 L mg⁻¹ cm⁻¹

1. Describe las diferencias que observas entre los espectros de las dos muestras.

2. ¿En cuál de las dos muestras el DNA está mejor purificado?
muestra 1 muestra 2

3. Calcula la concentración de DNA en la etapa "c" de cada una de las muestras.
Muestra 1: mg/L
Muestra 2: mg/L

4. Calcula la cantidad de DNA que había en 100 g de tejido (Para ello has de tener en cuenta las diluciones que se han ido realizando del DNA)
Muestra A: mg / 100 g de tejido
Muestra B: mg / 100 g de tejido

% proteína % DNA	en color Superponer curvas
Marcar longitudes de onda características
Ejemplos: