7.3 Acción de DNasas sobre el DNA genómico
Organización de la cromatina en nucleosomas
Uno de los principales apoyos experimentales para el descubrimiento de la existencia de los nucleosomas (pág. 84) fue el análisis mediante electroforesis de la cromatina fragmentada con nucleasas carentes de especificidad por una secuencia, como la nucleasa del micrococo (MNasa o nucleasa S7).
(Puede consultar el módulo electroforesis para más detalles de la técnica de separación.)
Calle 1: DNA genómico intacto.
Calle 2: DNA genómico tratado con nucleasas.
Calle 3: DNA genómico desprovisto de proteínas y luego tratado con nucleasas.
← pocillos de muestra
Aplicar muestras (el color morado se debe al colorante que se añade para controlar el avance)
Desarrollar la electroforesis (las bandas en gris-negro corresponden al DNA, aunque en la realidad no es visible)
Apoptosis
Una de las características del proceso de apoptosis (pág. 468) es la fragmentación del DNA cromosómico. Esta se detecta experimentalmente mediante electroforesis y observación del patrón de bandas "en escalera".
Como ejemplo, se muestra el resultado de un experimento real:
Calles 1 y 2: DNA extraido de células control.Calles 3 y 4: DNA extraído de células sometidas a un compuesto inductor de apoptosis.
El DNA se separó en un gel de agarosa y se reveló empleando bromuro de etidio y fotrografiándolo bajo luz ultravioleta.