Leemos en el cromatograma de la muestra los Ve de sus dos componentes: 15.5 y 20 mL. Leemos en el cromatograma de la muestra los Ve de sus dos componentes: 15.5 y 20 mL.
Construimos una tabla con los datos de los patrones y con ellos una curva de calibrado (dada la gran dispersión de valores de masa molecular, es habitual representar éstos en una escala logarítmica, para conseguir agruparlos y además normalmente así se ajustan mejor a una recta).
Puesto que la distribución de puntos patrón es bastante lineal, ajustamos a una recta (lo ideal sería un ajuste por regresión no lineal a una curva logarítmica). La ecuación resultante es:
Mr es “masa molecular relativa”, es decir, sin unidades; si ponemos “Da” o “kDa” ya hay unidades y es “masa molecular”, mejor que “peso molecular”. El ajuste se hizo con los valores numéricos de kDa, por lo cual la variable Y es Mr/1000
Nótese la escala logarítmica en el eje de ordenadas.
Interpolando el volumen al que han eluido las dos proteínas componentes de la muestra (picos a 15.5 y 20 mL) obtenemos: 151 y 75 kDa.