Recuento celular: determinación de la concentración de células en una suspensión
Hemocitómetro: portaobjetos especial para contar células bajo el microscopio.
También se le llama cámara de Neubauer.
En la imagen se observan también dos cubreobjetos.
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Esquema del hemocitómetro y procedimiento a seguir:
Cada porta tiene dos cámaras de recuento.
La muestra (suspensión de células) se aplica en el borde del cubre y entrará por capilaridad al espacio entre el porta y el cubre, llenando una de las cámaras.
La altura de dicho espacio en una cámara de Neubauer es habitualmente de 0,1 mm
Hay retículas trazadas en cada cámara de recuento que la dividen en 9 zonas cuadradas, de 1 mm de lado cada una.
Las 4 zonas de las esquinas tienen una retícula interior más espaciada, la central una retícula más densa.
Si se cuentan las células en los 4 cuadros de las esquinas, el volumen correspondiente es de 4 × ( 1 mm × 1 mm × 0,1 mm ) = 4 × 0,1 mm3
0,1 mm3 = 0,1 × 10−9 m3 = 0,1 × 10−9 × 103 L = 10−7 L = 10−4 mL
Entonces se puede calcular la concentración de células como
N células / (4 × 10−4 mL) = N / 4 × 104 células/mL
siendo N = nº total de células contadas en las 4 zonas
¿Cómo contar las células que tocan los bordes de un recuadro?
Para evitar ignorarlas o contarlas dos veces, en cada recuadro se cuentan las que tocan dos de los lados, siempre los mismos, y se ignoran las que tocan los otros dos.
Por ejemplo, se cuentan las que tocan los lados izquierdo o superior: en el cuadro 1, se contarán las verdes pero no las moradas.
Ejemplo y ejercicio
En la imagen de ejemplo, haz el recuento de células en las
y calcula la concentración celular de la muestra.