Determinación de cuerpos cetónicos en orina.
Experimento virtual.

1. Preparación de los patrones para calibrar el ensayo

Reactivos:

Se debe preparar una serie de tubos (disoluciones patrón) con concentraciones decrecientes y conocidas de acetoacetato: 16, 8, 4, 1.5 y 0.5 mM.
Cada disolucion patrón se preparará diluyendo la anterior. El volumen total de cada una debe estar comprendido entre 200 y 500 µℓ

tubo
nº		 concentración
deseada		 patrón
anterior 		volumen a tomar
de la disolución
patrón anterior (µℓ)		 volumen de
agua (µℓ)		  
P1 16.0 mM P0
P2 8.0 mM P1
P3 4.0 mM P2
P4 1.5 mM P3
P5 0.5 mM P4

Luego puedes si tu preparación es correcta. Todos los volúmenes son correctos. 👍

2. Realización del ensayo

Si no ves el capilar a la izquierda del tubo m1, pulsa aquí
alternar sonido
m1 m2 m3
A
B
C
Patrones de calibrado:

En este experimento se pretende valorar de forma semicuantitativa la concentración de cuerpos cetónicos en las muestras de orina m1, m2 y m3.

Instrucciones

  1. Para mover el capilar, tómalo por su parte inferior con el puntero del ratón.
  2. Arrastra el capilar a uno de los tubos con muestra.
  3. Arrastra el capilar colocando su extremo inferior en el centro de una almohadilla (zona coloreada) en una de las tiras reactivas, para aplicar la muestra. La reacción de cuerpos cetónicos sólo funciona en la segunda almohadilla desde la izquierda.
  4. Arrastra el capilar al contenedor de residuos (luego aparecerá uno nuevo a la izquierda)
  5. Repite el proceso con otra muestra, aplicándola a otra tira reactiva.
  6. Espera a que se desarrolle el color.

En tu cuaderno de laboratorio: anota el código asignado a tu experimento (en este caso es y cuál de las muestras (m1, m2 o m3) has aplicado en cada una de las tiras reactivas (A, B, C). Comparando el color obtenido con los de los patrones de calibrado, haz una estimacion de la concentración de cuerpos cetónicos en cada muestra. Finalmente, interpreta los resultados: ¿hay cetosis? ¿indicios de diabetes?

Fundamento de la reacción:

El acetoacetato se detecta mediante una reacción con nitroprusiato que forma un producto coloreado:

nitroprusiato sódico



Autor: Angel Herráez. Parte de la sede web Biomodel.uah.es

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