Traducción hecha en la Universidad de Alcalá de Henares, España

Problemas sobre tecnología del DNA recombinado

Tutoría para el problema 11: identificación de recombinantes

Una característica clave de la mutagénesis insercional para la identificación de plásmidos que contienen DNA recombinado es: 

A.  la producción de auxótrofos nutricionales.
B.  la secuenciación del DNA de los plásmidos recombinados.
C.  la generación de mapas de restricción de los plásmidos recombinados.
D.  los intrones pueden ser desplazados a nuevas posiciones dentro del gen.
E.  la disrupción de un gen en el plásmido debido a la inserción de DNA recombinado.

Tutoría

Mutagénesis insercional

El plásmido vector contiene otro gen identificable (por ej., para resistencia a una segunda droga o para una actividad enzimática), cuya secuencia codificante contiene el lugar de restricción para la inserción. 

La inserción del DNA ajeno en ese lugar interrumpe el marco de lectura del gen, generando una mutagénesis insercional.

Ejemplo

En el ejemplo mostrado,  se inactiva el gen de la ß-galactosidasa.

El sustrato "X-gal" se convierte en un producto de color azul si el gen está intacto, es decir, si se produce la enzima activa.

Las colonias blancas en el ensayo X-gal indican la presencia de DNA recombinado en el plásmido.


Problema 11 | Respuesta

El Proyecto Biológico > Biología Molecular > DNA recombinado


El Proyecto Biológico
University of Arizona
Updated: July 15, 1999
Traducido: junio 2005
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