Comparación del uso de nucleótidos marcados

Unos métodos de marcaje dependen de dNTP o NTP marcados en el fosfato alfa, otros en el gamma. Analicemos la razón:

(Pulse en las flechas para ver el producto de las reacciones)

α-[32P]-NTP γ-[32P]-NTP
+ ATP
   
+ ATP
   
El objetivo es marcar la molécula de DNA incorporándole nucleótidos marcados. El objetivo es marcar el extremo de la molécula incorporándole un fosfato.
Los nucleótidos serán dNTP para que la DNApol sintetice (elongue) un DNA. El nucleótido es ATP, sustrato de la quinasa.

Métodos que emplean una polimerasa:

  • marcaje por traslado de la mella
  • marcaje por cebado aleatorio
  • marcaje terminal por relleno

Métodos que emplean una quinasa:

  • marcaje terminal con polinucleótido quinasa

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