2.10 Absorción de la luz por nucleósidos y nucleótidos

Los nucleósidos y los nucleótidos conservan el pico de absorción próximo a 260 nm propio de sus bases constituyentes (véase absorción de la luz por las bases nitrogenadas).

Ejercicio:
  Espectro de una mezcla de nucleótidos:

μM de AMP   μM de GMP   μM de TMP   μM de CMP   μM de UMP  

trazar el espectro
A260 =

A280 =

A260/A280 =

Ejercicio: una aplicación práctica de esta propiedad:
Una mezcla de nucleótidos, obtenida por hidrólisis de una muestra de DNA, posee una absorbancia a 260 nm de 0,547 (medida en una cubeta con paso óptico de 1 cm). Suponiendo que la composición de ese DNA sea equimolar en los cuatro desoxirribonucleótidos, calcule la concentración milimolar de nucleótidos en la mezcla analizada.

Para resolverlo:
1. Recuérdese que los valores de absortividad (o coeficiente de extinción) pueden usarse para calcular la concentración, a partir de la fórmula

2. Será, pues, necesario disponer del dato de absortividad de cada nucleótido, que puede obtenerse con el simulador gráfico anterior.

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3. La absorbancia medida será la suma de la contribución de los 4 nucleótidos:
A = ε(A) · b · [A] + ε(G) · b · [G] + ε(T) · b · [T] + ε(C) · b · [C] =
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Luego la concentración de nucleótidos será

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Ejercicio:
Resuelva el problema para un DNA con 30% de A, 20% de G, 30% de T y 20% de C, cuya absorbancia es de 0,614.

Respuesta: mM verificar

Véase también absorción de la luz por los ácidos nucleicos.