Los nucleósidos y los nucleótidos conservan el pico de absorción próximo a 260 nm propio de sus bases constituyentes (véase absorción de la luz por las bases nitrogenadas).
Ejercicio:
Espectro de una mezcla de nucleótidos:
μM de AMP μM de GMP μM de TMP μM de CMP μM de UMP
Ejercicio: una aplicación práctica de esta propiedad:
Una mezcla de nucleótidos, obtenida por hidrólisis de una muestra de DNA, posee una absorbancia a 260 nm de 0,547 (medida en una cubeta con paso óptico de 1 cm). Suponiendo que la composición de ese DNA sea equimolar en los cuatro desoxirribonucleótidos, calcule la concentración milimolar de nucleótidos en la mezcla analizada.
Para resolverlo:
1. Recuérdese que los valores de absortividad (o coeficiente de extinción) pueden usarse para calcular la concentración, a partir de la fórmula
2. Será, pues, necesario disponer del dato de absortividad de cada nucleótido, que puede obtenerse con el simulador gráfico anterior.
3. La absorbancia medida será la suma de la contribución de los 4 nucleótidos:
A = ε(A) · b · [A] + ε(G) · b · [G] + ε(T) · b · [T] + ε(C)
· b · [C] =
mostrar respuesta
Luego la concentración de nucleótidos será
Ejercicio:
Resuelva el problema para un DNA con 30% de A, 20% de G, 30% de T y 20% de C, cuya absorbancia es de 0,614.
Respuesta: mM verificar
Véase también absorción de la luz por los ácidos nucleicos.