Separación de aminoácidos empleando cromatografía en capa fina.
Experimento virtual.

Realización del ensayo:

alternar sonido

Etapa 1

Etapa 2

Etapa 3

foto

Las muestras 1 y 2 para este experimento son mezclas de aminoácidos cuya composición se pretende analizar.

Para la identificación se dispone de 5 patrones de aminoácidos puros disueltos en agua:

Etapas del experimento

1: Se aplican muestras y patrones a la placa recubierta con gel de sílice (fase estacionaria de la cromatografía)

2: La placa se introduce en la cubeta que contiene fase móvil (mezcla de disolventes), se tapa y se espera a que la fase móvil ascienda; se detiene pasando a la etapa 3.

3: Se saca la placa, se espera a que se evapore el disolvente y se procede al revelado de los aminoácidos pulverizando con la disolución de ninhidrina (la etapa necesaria de calentamiento para facilitar la reacción no se muestra aquí).

Instrucciones

  1. Para mover el capilar, tómalo por su parte inferior con el puntero del ratón.
  2. Arrastra el capilar a uno de los tubos con muestra o patrón.
  3. Arrastra el capilar hacia la placa de fase estacionaria, colocando su extremo inferior sobre una de las posiciones de aplicación (a, b, c, d, e, f), a la altura de las líneas laterales de referencia.
  4. Arrastra el capilar al contenedor de residuos (luego aparecerá uno nuevo a la izquierda)
  5. Repite el proceso con la otra muestra y con los 5 patrones, aplicando cada uno en una posición diferente. Anota lo que has aplicado en cada una de las 7 posiciones de la placa.
    Puedes aplicar las muestras en cualquier orden y cualquier posición.
  6. Pulsa en el botón ▶ para pasar a la etapa siguiente (nº2), donde se desarrollará la cromatografía de modo automático.
  7. Antes de que la fase móvil llegue arriba, pulsa en el botón ▶ para sacar la placa pasando a la etapa siguiente (nº3).
  8. Pulsa en el bote aerosol que contiene la ninhidrina y arrástralo sobre la placa; espera para que se desarrolle el color.
  9. Puedes pulsar en la cámara de fotos para capturar una imagen que se puede copiar o guardar usando el menú contextual del navegador (la foto incluye además el código del experimento, la fecha y la hora).

En tu cuaderno de laboratorio: anota el código asignado a tu experimento (en este caso es y qué has aplicado en cada una de las posiciones de la placa. Añade la foto del resultado. Justifica la distinta movilidad de cada patrón en relación con su estructura. Comparando el resultado de las muestras con los patrones, explica qué aminoácidos contiene cada una de las muestras.

Fundamento de la reacción de revelado:

La ninhidrina forma un conjugado de color púrpura con el grupo amino primario de los aminoácidos:

Autor: Angel Herráez. Parte de la sede web Biomodel.uah.es

CC by-nc-sa Se ofrece para su uso bajo los términos de la Licencia Creative Commons Reconocimiento – NoComercial – CompartirIgual.

Programado en HTML5, CSS y JavaScript y previsiblemente compatible con todo tipo de navegadores, sistemas operativos y dispositivos. Se utilizan prestaciones de las bibliotecas de código abierto Dragula (de bevacqua, MIT License), DOM to Image (Anatolii Saienko y Paul Bakaus, MIT License), así como TinyBox.