Hibridación

1. DNA simple (de copia única).
2. Se corta el DNA en trozos iguales.
3. Se desnaturalizan los fragmentos de DNA.
4. Cada pareja de hebras es diferente en el caso del DNA simple. (Los pequeños símbolos marcan cada una de las parejas).
5. Se mezclan todos.
6. Se incuban.
7. El tiempo que tardan todan las hebras en reemparejarse depende de la concentración y el tiempo (Cot).
8. (Eje Y) 100% de hebra sencilla -- 100% de doble hebra. (Eje X) Cot.
9. DNA complejo (repetitivo)
10. Se corta el DNA en trozos iguales.
11. NOTA: el tamaño de los trozos es igual para el DNA simple y el complejo.
12. Se desnaturalizan los fragmentos de DNA.
13. Algunas parejas están repetidas en el caso del DNA complejo. (Los pequeños símbolos marcan cada una de las parejas).
14. Se mezclan todos.
15. Se incuban.
16. Al haber parejas duplicadas, las hebras para las que hay más de una posible combinación se reemparejan más rápido... cuanto más fragmentos similares haya, más rápido se emparejan.
17. (Eje Y) 100% de hebra sencilla -- 100% de doble hebra. (Eje X) Cot.

Comentarios:

a) Más que de hibridación (con un DNA de otro origen, frecuentemente una sonda), esta película trata de la cinética de reasociación de un DNA.

b) Se habla de un DNA simple (por contraposición a complejo) cuando no posee secuencias repetidas; es lo que se llama también un DNA de copia única. Esto es característico de los organismos procariotas. La diferencia entre ambos es patente en lo relativo a la cinética de reasociación o de hibridación, como se observa en la película.

c) El término "Cot" procede de "C₀ multiplicado por t", es decir, concentración inicial de DNA multiplicada por tiempo de reasociación.

d) La velocidad con la que se reasocia cada fragmento de hebra sencilla depende de la probabilidad de que encuentre una hebra complementaria. Por eso, a mayor contenido de DNA repetitivo, mayor rapidez de reasociación: el DNA más repetitivo se reasocia antes, y si hay distintos grados de repetición la curva Cot tiene varias fases.

Esta película se ha tomado de http://www.dartmouth.edu/ artsci/bio/cbbc/courses/ bio23/bio23-1998/ index-b23-98.html, Prof. Tom Jack y Prof. Bob Gross, curso Bio23, Dartmouth College, Hanover, NH, USA; traducción del texto y comentarios añadidos por Angel Herráez, Universidad de Alcalá)